Enzyme-Linked Immuno-Sorbant Assay

소개글

Enzyme-Linked Immuno-Sorbant Assay에 관한 생화학 레포트입니다

목차

1. introduction
2.Materials & Methods
Results
4.Discussion

본문내용

Enzyme-Linked Immuno-Sorbant Assay(ELISA)
기본 방법은 polystyrene matrix에 hydrophobic interaction에 의해 강하게 bind된 small antigen이 있는 microtiter plate의 well에 1차 anyibody를 넣어준다. 그리고 unbound fraction을 씻어주고 다시 2차 antibody를 넣어준다. 그리고 다시 washing을 해준 후에 substrate를 통해 2차 antibody가 색을 나타나게 해준다. 그리고 1차 antibody의 희석배수를 다르게한 여러 개의 tebe를 spectrophotometry를 통해 관찰하면 Ab의 양에 따른 A490의 차이를 확인할 수 있다. 이 것이 indirect ELISA이다.
sandwich ELISA는 antibody를 plate의 well에 고정시키고 여기에 antygene을 첨가해주고 그 antigene에 반응하는 고정된 antibody와 다른 동물에서 뽑은 antibody를 첨가해주고 다시 여기에 2차 antibody를 넣어주는 방법이다.
competitive ELISA는 antibody를 limiting하지 않고, 여기에 antigene과 경쟁 관계에 있는 물질을 넣어주어 antibody가 고정되어 있는 않는 antigene의 농도에 따라 고정되어 있는 antibody와 결합하는 정도가 달라지게 하는 방법이다.

참고 자료

http://home.inje.ac.kr/~lecture/immunollab/lab03.htm
- Biochemistry Lab Manual, Lab VII. Western blot (Immunoblot), Chang-Hoon Han, Hang Lee, Mun-Han Lee, p. 33~36