[식품 분석학 실험 보고서 - 예비 및 결과 2부] DPPH 측정, 총 폴리페놀 함량 측정

소개글

DPPH 는 매우 안정한 자유라디칼로, 라디칼 소거활성이 있는 항산화제에 의해 정량적으로 탈색되어 항산화활성을 쉽게 측정할 수 있습니다. Folin Ciocalteu`s assay 를 활용하여 총 폴리페놀 함량을 측정하였으며 해당 sample 이 (보성녹차, 하늘보리, 헛개차, 헛개수) 얼마나 큰 항산화성을 가지고 있는지를 파악하였습니다. 흡광도 결과와, standard (GA-OD) curve 를 이용하여 각 sample 의 농도를 mg GAE/ml 로 계산하였고 결과를 분석하였습니다.

목차

1. 예비레포트
1) 실험의 주요 개념 및 실험법
-활성산소 (항산화반응, 자유라디칼저해)
-DPPH 에 의한 free radical 제거능 (DPPH란, IC50, 실험 방법)
-총 폴리페놀 함량 측정 (Folin-Denis 방법)

2) 실험의 의의

3) 참고 문헌


2. . 결과 레포트
1) 실험의 원리
- DPPH
- 총 폴리페놀 함량 측정 (Folin Ciocalteu`s assay)

2) 실험 방법
- 재료 및 기구 (재료 및 시약, 기구)
- 수행절차, DPH에 의한 free radical 제거능
- 수행절차, 총 폴리페놀 함량 측정 (Folin Ciocalteu`s assay)

3) 실험 결과
-DPPH법
-Folin Ciocalteu`s assay (Sample, Standard, Calculation)

4) 고찰
-DPPH법
-Folin Ciocalteu`s assay

5) 참고 문헌

본문내용

2-1) 수행절차, DPPH에 의한 free radical 제거능
ⅰ. 0.2mM DPPH 시약 500㎕ 와 sample 500㎕ 를 혼합하여 30min 정확히 반응시킨다.
ⅱ. Control 로서 0.2mM DPPH 시약 500㎕ 와 DW 500㎕ 를 혼합하여 30min 정확히 반응시킨다.
ⅲ. 반응시 시험관을 은박지로 씌우고, 암실에 둔다.
ⅳ. 반응이 완결되면 517nm 에서의 흡광도를 구하고, 저해율을 계산한다.
저해율(%)=
(:시료 첨가하지 않은 대조구의 흡광도, :시료 첨가한 반응구의 흡광도)

2-2) 수행절차, 총 폴리페놀 함량 측정 (Folin Ciocalteu`s assay)
ⅰ. 200㎕의 sample 과 200㎕의 Folin & Ciocalteu`s phenol reagent를 시험관에 넣고 vortex 한 뒤 10분정도 둔다.
ⅱ. 2㎖ 의 7.5% Na2CO3 용액을 각 시험관에 추가로 담고 vortex를 실시한다.
ⅲ. 1시간 정도 발색시킨 후, 765nm 에서의 흡광도를 구한다.
ⅳ. 표준 용액 검량선 : 0.1 g/200㎖ gallic acid 용액 (=0.1㎎/200㎕) 으로 standard 를 0, 0.01, 0.02, 0.04, 0.06 ㎎/200㎕ 로 흡광도 측정하여 추세선을 작성한다.

참고 자료

식품분석학, 노봉수 외 공저, 수학사, p. 196-199
DPPH법에 의한 항산화활성 평가, 이동진/이지영, 단국대학교
식품 분석학, 노봉수 외 공저, 수학사, p. 190