생화학 실험

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험목적
4. 기초이론
5. 실험방법
6. 실험결과
7. 조사내용
8. 고찰

본문내용

실험목적

☞ 재조합 단백질 제작과 생산의 의의를 이해한다.
☞ 박테리아에서 재조합 단백질을 발현하는 벡터와 기본원리를 이해한다.
☞ 유핵세포에서 재조합 단백질을 발현하는 벡터와 기본원리를 이해한다.
☞ 단백질 전기영동의 기본원리를 이해한다.
☞ 면역블롯팅의 원리를 이해한다.

4. 기초이론

☞ Lactose 오페론은 평소 promoter다음, operator위치에 repressor가 결합하고 있는 상태이지만 allolactose를 넣어주면 allolactose가 repressor와 결합하여 Lac 오페론 유전자로부터 repressor를 떼어내게 되고 결국 단백질 합성이 일어나게 된다. 이 때 쓰이는 allolactose를 inducer라 하고 이와 비슷한 구조를 가지고 같은 기능을 보이는 화합물중 대표적인 것이 바로 IPTG인데 E.coli 단백질 발현벡터의 promoter 뒤에는 Lac operator가 있어 단백질을 발현하고자 할 때는 IPTG를 넣어주어야 한다.

☞ GST (Glutathione s-transferase)은 Glutathione의 affinity chromatography를 통해 아주 높은 효율로 단백질 정제를 가능하게 해주는 물질이다. 또한 GST는 전자친화성 기질을 Glutathione에 결합시키는 반응의 생체촉매 역할을 함으로써 해독작용에도 영향을 미친다.

☞ SDS는 계면활성제의 한 종류로 단백질의 모든 고차구조를 해체하여 1차 구조, 즉, 직선형으로 만든다. 그리고 직선화된 단백질의 표면을 둘러싸서 전하를 상쇄합니다. 즉, 전하, 3~4차구조 등을 배제하여 오로지 크기에 의해서만 분리가 가능한 조건을 만들어준다. 이때 SDS에 의해 둘러쌓인 단백질은 산성 염기성을 가리지 않고 모두 -charge를 띠게 되어 전기영동을 하게 되면 같이 - 에서 + 방향으로 이동한다.

참고 자료

없음