생화학실험 (생화실) 친화 크로마토그래피 (affinity chromatography) 실험 레포트 입니다.

소개글

생화학실험 (생화실) 친화 크로마토그래피 (affinity chromatography) 실험 레포트 입니다.

Ni-NTA 수지(resin), 컬럼, sodium phosphate 완충용액(0.1M sodium phosphate, pH 7.0), 용출용 완충 용액[0.1M sodium phosphate, pH 7.0, 농도별 imidazole 10mM, 20mM,200mM], 히스티딘 융합 단백질을 함유한 전체 단백질 추출액을 이용하여 centri, sonication을 한 후 단백질을 분리하였습니다.

목차

(1) 서론
1) 실험목적
2) 이론적 배경

(2) 재료 및 방법
1) 실험 재료
2) 실험 방법

(3) 실험 결과

(4) 논의 (Discussion)

(5) 참고자료

본문내용

(1) 서론
1) 실험 목적
- 친화 크로마토그래피의 종류와 원리를 이해한다.
- 친화 크로마토그래피를 이용한 단백질 분리 방법을 실습하고 습득한다.

2) 이론적 배경
- 비슷한 질량과 알짜 전하를 띤 단백질들의 분리는 상대적으로 어려워 대상 단백질만을 한 번에 분리하기에 용이 하지 않다. 때문에 타겟 단백질에 특이적으로 결합하는 물질을 이용한 친화 크로마토그래피(affinity chromatography)는 대상 단백질을 분리하는 가장 효율적인 방법으로, 대상 단백질(효소)에 특이적으로 결합하는 물질(기질)이나 항체나 특이적 결합 물질을 고정화한 수지(resin)을 이용한다.
- 특히 재조합 DNA 기술을 통한 융합 또는 재조합 단백질 제조 기술의 발달은 친화 크로마토그래피에 응용되어 쉽게 대상 단백질을 시료로부터 분리, 정제하여 생물학적/생화학적 기능을 밝히는 데 많이 사용되고 있다.
- <히스티딘 태그/니켈(His-tag/Ni-NTA) ; 니켈과 히스티딘의 결합을 이용하여 단백질을 분리하는 방법이다.

참고 자료

부성희,조만호,이상원,김기영(2016)/생화학실험/pp.84-90