[분자생물학실험] DNA Ligation and Transformation of Bacterial Cells
- 최초 등록일
- 2017.11.03
- 최종 저작일
- 2011.12
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목차
1. Summary
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Result and Discussion
5. Reference
본문내용
Summary
Ligation은 ligase를 이용하여 insert DNA fragment와 plasmid vector 끝에 phosphodiester bond를 만드는 것을 뜻한다. 또한 Calcium Chloride에 의하여 세포벽에 약해진 competent cell을 이용하여 우리는 transformation에 이용할 수 있다. 우리는 이번 실험에서 T4 ligase를 사용해 pGEX 6p-1 plasmid vector에 insert DNA를 ligation 한 후, DH 5α competent cell에 heat shock을 주어 transformation을 하였다.
Key words : Ligation, Competent cell, Transformation
Introduction
Restriction enzyme을 이용하여 plasmid와 insert로 사용할 DNA fragment를 digestion시켜 주었다면 그 다음 진행해야 할 과정은 ligation이다. Ligation은 DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 뜻한다.
참고 자료
Lehninger Principles of Biochemistry (fifth edition)/ David L.Nelson, Michael M.Cox/ Freeman/ p304, 305, 306, 307
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php
http://www.genehunters.co.kr/Training/01_1_3.htm