7. DNA 제한 효소 예비[A+ 받은 레포트]

목차

1. 실험 날짜
2. 실험 인원
3. 실험 제목
4. 실험 목적
5. 실험 기구 및 시약
6. 실험 원리
7. 실험 방법

본문내용

3. 실험 제목 : DNA 제한효소

4. 실험 목적 : lambda DNA을 제한효소로 절단하고, 이를 전기영동을 통해서 확인한다.

5. 실험 기구 및 시약 : Micro-tube, 전자레인지, 6X DNA loading buffer, 50X TAE buffer, Agarose, RedSafe, DNA 전기영동 기계, Restriction enzyme(Eco R1, Hindⅲ), Lambda DNA, DNA marker, Restriction enzyme buffer

- redsafe : DNA 염색 시약. DNA 염색에 자주 사용되는 EtBr(ethidium bromide)에 비하여 돌연변이 유발이 적으며, 비슷한 민감도를 가진다. DNA, RNA와 결합하여 녹색 형광을 띈다.
- buffer : 6X, 50X와 같은 buffer 농축액을 이용하는 이유는 고농도로 buffer를 만들어 놓으면 미생물의 오염을 방지할 수 있으며, 자주 만들어야하는 번거로움을 덜 수 있기 때문이다. 일반적으로 1X가 working concentration이다.

6. 실험 원리
DNA
생물체 내에는 DNA(deoxyribonucleic acid)와 RNA(ribonucleic acid)의 2종류의 핵산(nucleic acid)이 발견된다. 핵산은 중합체로 뉴클레오티드(nucleotide)가 무수히 많이 직렬로 축합되어 이루어지는 고분자이다. 뉴클레오티드는 또 세 부분으로 나뉘는데 탄소원자 다섯 개로 만들어지는 오탄당(빈 오각형), 인산(원), 그리고 염기(알파벳이 있는 다각형)로 구성되어있다.
오탄당은 핵산의 종류에 따라 다른데, RNA에서는 리보스(ribose)가 발견되고 DNA에서는 리보스의 히드록시기가 수소원자로 치환된 형태인 디옥시리보스(deoxyribose)가 발견된다.
염기는 오탄당의 1번 탄소와 결합되어 존재한다.

참고 자료

T.A. Brown, “유전자 클로닝 입문”, 월드 사이언스, 2004/4th, pp52-84
한국생화학회, “실험생화학”, 3판, 탐구당, 1993
화악용어사전편찬회, “화학용어사전”, 일진사, 2006