[생물실험1] 광합성 색소의 분리 결과보고서

소개글

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목차

1. 실험 목표

2. 실험원리
(1) 크로마토그래피
(2) 광합성 색소
(3) 전개율(Rf값)
(4) 각 엽록소의 함량 구하기

3. 실험준비물 및 과정
(1) 실험준비물
(2) 실험과정

4. 실험결과
① 광합성 색소의 분획 결과
② 엽록소 a의 흡광도 측정 결과
③ 흡광도 곡선을 그래프로 그리고 엽록소 a의 최대흡수 파장을 측정하시오.
④ 엽록소 b의 흡광도 측정 결과
⑤ 흡광도 곡선을 그래프로 그리고 엽록소 b의 최대흡수 파장을 측정하시오.
⑥ 엽록소 함량 측정의 결과

5. 고찰

본문내용

1. 실험 목표
얇은 막 크로마토그래피(TLC)로 식물의 광합성 색소를 분리하고 각 분획 별 색소의 이화학적 특성을 조사한다.

2. 실험원리

(1) 크로마토그래피
혼합물에 들어있는 매우 적은 양의 물질을 분리하고 확인하는 데 쓰이는 방법으로, 적절한 정지상과 이동 상을 사용하여 혼합물의 이동속도 차이를 이용해 분리해낸다. 분리․ 분석, 화합물의 정제, 분자량의 측정 등에 사용된다. 크로마토그래피는 분리뿐만 아니라 물질의 확인 과정에도 매우 유용하다. Rf값(용질의 이동 거리/용매의 이동 거리)을 이용해서 물질을 확인할 수 있다.

① 종이 크로마토그래피
종이 크로마토그래피는 원리상으로 분배 크로마토그래피의 일종이다. 분배 크로마토그래피에 의한 분리는 두 가지 종류의 서로 혼합되지 않는 용매 사이에서 혼합물들이 두 용매에 대한 분배 계수가 다른 원리를 사용한다. 종이 크로마토그래피에 있어서 거름종이에 흡착된 용매는 정지상의 구실을 하고, 물과 섞이지 않는 유기 용매는 이동상의 구실을 한다. 일반적으로 거름종이는 약 20%의 흡착수가 포함되어 있으므로 거름종이에 시료를 녹이는 것에 해당하며, 거름종이는 정지상을 지지해 주는 지지체 역할을 한다.
시료 용액을 거름종이에 소량 찍어 점적하고 말린 다음, 밀폐된 용기 속의 물로 포화한 유기 용매에 그 한쪽 끝을 담가 두면, 용매는 모세관 현상에 의하여 종이의 위쪽으로 스며 올라가거나 중력에 의해 아래쪽으로 이동하게 된다. 이때, 시료의 성분도 용매와 함께 이동하지만, 각 성분은 물과 유기 용매에 대한 용해도의 차이 때문에 이동속도가 각각 다르게 된다. 즉, 유기 용매에 잘 녹는 성분은 덜 녹는 성분보다 먼 곳까지 이동하게 되므로, 거름종이 위에서 성분들이 분리된다.
종이 위에 분리된 각 성분의 위치는 이들이 무색일 경우에는 적당한 발색 시약을 뿌려서 쉽게 확인할 수 있다. 또, 각 성분의 이동 거리는 Rf값으로 나타낸다.

참고 자료

Campball, 생명과학 7판, 라이프사이언스, 2007, pp186-188
로버트 A 외 2인, 생물학 - 생명의 과학, 을유문화사, 1993, pp155-157
한국생물과학협회, 생물학실험, 아카데미서적, 1993, pp155-163