[생물화학공학실험]Liquid culture & Expression

소개글

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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Results & Discussion
4. Conclusion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
특정 단백질을 발현시키기 위해 이전 실험과 같은 Restriction, Ligation과 같은 유전자 조작 과정이 선행적으로 수행된다. 단백질 발현의 확인은 여러 방법들에 의해서 수행될 수 있으며, 이러한 과정들은 다소 복잡한 과정이다. 이러한 방법을 개선하기 위해서, 유전자 조작과정에서 형광단백질을 암호화 하는 eGFP DNA를 삽입하여 단백질 발현을 가시적으로 확인할 수 있다.
실험의 과정은 다음 세 가지로 나눠진다. LB배지 제조, 균 배양(대조군 포함) 후 600nm에서 O.D 측정 (0.6~0.8), IPTG 투입 후 UV transilluminator에서 확인과정이다.
실험결과는 Fig 5와 같으며, 녹색형광을 나타낸 것으로 보아, 유전자 조작을 진행한 균이 잘 배양되었음을 확인할 수 있다.

2. Experiment
1) 기구 및 시약
(1) Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside(IPTG) (1000X)
Lac operon을 이용하여 단백질 발현을 위해 사용되는 inducer이다.

참고 자료

세화편집부. “화학대사전1”. 세화(2001). P421
이행석 외 2인. “알기 쉬운 분자생물학”. 기전연구사(2006). P78-93
Reece 외 3인. “생명과학 개념과 현상의 이해 7th”.PEARSON(2011). P190-191
Gray D. Christian 외 2인. “ANALYTICAL CHEMISTRY 7th”. WILEY(2015). P474-477
실험노트