[일반생물학실험보고서] 발생학 실험 닭 발생 과정 관찰 및 SDS-PAGE 이론 + 결과 분석 보고서 (A+)

소개글

"[발생학실험실험보고서] 닭 발생 과정 관찰 및 SDS-PAGE 이론 + 결과 분석 보고서 (A+)"에 대한 내용입니다.

목차

I. Introduction
1. Fate Determination
2. Cell / Tissue lysis (세포 분해)
3. Sampling
4. Protein Electrophoresis (단백질 전기 영동)

II. Method
1. 실험 재료 및 기구
2. 실험 방법(Tissue lysis & Sampling)
3. 실험 방법(SDS-PAGE)

III. Result

IV. Discussion

본문내용

1) Fate Determination
배 발생 과정 동안 세포들은 분열에 의해 생겨나고, 몸의 특정한 위치를 차지하게 되며, 구조와 기능의 면에서 특별해지는 과정을 겪는다. 세포가 어디에 있는가, 세포가 어떻게 생겨나는가, 그리고 세포가 어떤 일을 하는가에 의해 그 세포의 발생학적 운명이 정의된다. 발생학자들은 세포 하나 또는 집단이 특정 운명으로 확정되는 과정을 결정(determination)이라고 명명하였다. 특정 조직, 그리고 종종 한 조직 내의 특정 세포들은 동일한 유전체에서 서로 다른 유전자를 발현시킴으로써 차이를 나타내게 된다.

예를 들어 위의 [그림 1]에서 볼 수 있듯이 생쥐와 닭은 같은 수의 척추를 가지지만 할당되는 뼈의 종류는 다르다. 이는 Hox 유전자의 발현 배합에 따라서 형성되는 척추의 종류가 다르기 때문이다.

1) Cell / Tissue lysis (세포 분해)
▶ Lysis buffer
가, Lysis buffer란
세포 화합물을 분석하는 분자 생물학 실험에 사용하기 위해 개방성 세포를 파괴할 때 사용하는 완충액
나, 선택의 중요성
단백질은 서로 다른 특징을 가지고 있고, 다른 세포 환경에서 발견된다. 실험에서 사용하는 단백질을 완전히 변성(denature)시키기 위해서 실험 목적에 가장 적합한 buffer를 선택해야 한다.
다, Lysis buffer 제작에 중요한 요인
pH, 이온의 세기(ionic strength), 계면 활성제(detergent)의 사용, 단백질 분해 효소 억제제(protease inhibitor)
라, 구성요소
(a) Buffer
완충용액은 단백질의 환경을 조성해준다. 각 완충용액은 특정한 pH 범위가 있으므로 실험에 사용하는 단백질이 어떤 pH에서 안정적인지를 기반으로 완충용액을 선택해야 한다. 그리고 비슷한 pH 범위라도 실험에 사용하는 단백질과 양립(compatible)할 수 있는지가 중요하다.

참고 자료

발생생물학 | SCOTT F. GILBERT 저 / 강해묵 역 | 라이프사이언스 | 2011.03.01.| 원제 : Developmental Biology
장수철, 강두나, 전상학, 2008, 『닭 발생 관찰을 통한 양막류 발생의 이해』, 『현장과학교육』 2(1), pp67~76
Paul Menter, Bio-Rad Laboratoires, 2000 Alfred Nobel Drive, Hercules, CA 94547 USA
『Lysis buffer』, 『Dithiothreitol』, 『Coomassie Brilliant Blue』, 『SDS-PAGE』『Polyacrylamide』, 『PMSF』, 『Protein structure』, 『Glycine』 위키피디아,
https://en.wikipedia.org/wiki/Lysis_buffer
https://en.wikipedia.org/wiki/Dithiothreitol
https://en.wikipedia.org/wiki/Coomassie_Brilliant_Blue
https://en.wikipedia.org/wiki/SDS-PAGE
https://en.wikipedia.org/wiki/Polyacrylamide
https://en.wikipedia.org/wiki/PMSF
https://en.wikipedia.org/wiki/Protein_structure
https://en.wikipedia.org/wiki/Glycine
『단백질 분석!! SDS-PAGE의 실험 방법 및 원리들!! - #7』, 유튜브,
https://www.youtube.com/watch?v=GOJtXbZ4mh4