Cell seeding & Western blot sample harvest
- 최초 등록일
- 2020.10.14
- 최종 저작일
- 2020.05
- 5페이지/
한컴오피스
- 가격 2,000원
소개글
본 리포트는 Cell seeding과 Western blot sample harvest에 관한 내용이 기술되어 있습니다. 본 실험에서는 hemocytometer를 이용하여 cell counting을 시행하여 세포의 수를 계산하고 희석하는 방법을 다룹니다. 또한 lysis buffer를 이용함으로써 cell을 용해시켜 cell 내부의 protein을 추출하는 방법에 대해서도 다루고 있습니다.
목차
1. Date
2. Title
3. Purpose
4. Materials
5. Method
가. cell counting
나. cell seeding
다. Protein extraction
6. Result
7. Discussion
가. Hemocytometer의 구조와 원리
나. cell seeding을 위한 세포 배양액 희석하기
8. Remark
9. Reference
본문내용
1. Date : 2020.05.25.
2. Title : Cell seeding & Western blot sample harvest
3. Purpose :
가. hemocytometer을 이용한 cell counting을 통해 cell seeding에 사용될 세포의 수를 계산하고 희석할 수 있음.
나. lysis buffer를 이용하여 cell을 용해시켜 cell 내부의 protein을 extraction할 수 있음.
4. Materials : NIH3T3 cell (line), NIH3T3 ATG5 KO cell (line) (ATG5가 knockout된 NIH3T3 cell), 15ml conical tube, 50ml conical tube, pipette tip, serological pipette, 마이크로 피펫, S1 pipette filler, 0.05% trypsin-EDTA Solution, Centrifuge, DMEM 배지, 60mm dish, hemocytometer, 광학 현미경, RIPA buffer(cell lysis buffer), pre-chilled DPBS, Cell lifter, 1.5ml tube
5. Method :
가. cell counting
1) NIH3T3 cell line과 NIH3T3 ATG5 KO cell line을 CO2 incubator에서 꺼내어 clean bench에서 실험을 시작함.
참고 자료
Google search, “hemocytometer”, 2020.05,
https://en.wikipedia.org/wiki/Hemocytometer
ThermoFisher SCIENTIFIC, “Counting Cells in a Hemocytometer”, 2020.05,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-culture-protocols/counting-cells-in-a-hemacytometer.html
Cell Signaling TECHNOLOGY, “RIPA Buffer(10X)”, 2020.05,
https://media.cellsignal.com/pdf/9806.pdf
ThermoFisher SCIENTIFIC, “Trypan Blue Exclusion”, 2020.05,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-culture-protocols/trypan-blue-exclusion.html
