혈장 중 cholinesterase의 활성 측정

소개글

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목차

1. 실험 개요 및 원리
1) Cholinesterase
2) 혈장 중 cholinesterase의 측정 원리
3) 동물 실험

2. 실험 재료

3. 실험 방법

4. 결과

5. 고찰

본문내용

1) Cholinesterase
Cholinesterase는 cholinester를 choline과 유기산으로 가수분해 시키는 효소이다. 다른 esterase와의 차이는 4가 암모늄 이온에 큰 친화성을 가지는 점이다. Cholinesterase는 acetylcholinesterase와 pseudocholinesterase의 두 종류가 있다. Acetylcholinesterase는 동물의 신경세포에서 신경근접합부와 뇌의 회백질 등에 존재하여 콜린성 신경전도조절에 중요한 역할을 한다.

2) 혈장 중 cholinesterase의 측정 원리
* acetylthiocholine을 사용한다. acetylcholine에 thiol기가 붙은 것으로, Ellman 시약을 이용한 흡광도 계산을 위한 것이다.
acetylthiocoline이 효소에 의해서 thiocholine과 초산 혹은 유기산으로 분해된다.

(CH3)3N+CH2CH2SCOR + H2O ----> RCOOH + (CH3)3N+CH2CH2SH

이 반응액에 Ellman 시약 (DTNB, 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid)을 첨가하면 노란색의 음이온인 5-thio-2-nitrobenzoic acid가 형성된다. 이것의 흡광도를 410 nm에서 측정하면 thiocholine의 생성정도를 알 수 있다.

3) 동물 실험
* 3R 원칙
- Replacement : 실험 동물을 사용하는 것 말고 다른 대체 방법이 없는 지 찾아본다.
- Reduction : 실험 중에 동물이 받는 고통을 최소화한다. 또한 실험의 대상이 되는 동물의 수를 최소화 한다.
- Refinement : 실험 동물의 삶의 질을 향상 시킨다. 최소한의 고통, 위험, 스트레스를 받도록 하고 실험이 종료되어 실험 동물을 희생시킬 때에 고통을 최소화 하는 안락사 방법을 선택한다.

참고 자료

없음