예비2 PCR 5조 김

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목차

1. 실험 목적

2. 바탕 이론
1) PCR(Polymerase Chain Reaction)
2) 전기 영동법

3. 기구 및 시약
1) 실험기구
2) 시약

4. 실험 방법

5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
본 실험은 PCR(Polymerase Chain Reaction)라는 중합 효소 연쇄 반응을 통해 분리한 Plasmid DNA를 시험관 내에서 대량으로 증폭 및 복제를 시행하고, 해당 DNA를 전기 영동법을 활용하여 크기를 확인하는 실험이다. PCR은 유전자를 증폭하는 하나의 방법으로 DNA의 특정 염기 서열을 가지는 부위를 반복적으로 선택적 합성을 할 수 있어, 현제 다양한 생명공학 범위에서 활용된다. 해당 방법을 통해 결과적으로 소량의 DNA를 통해 다량의 목적 DNA를 생산할 수 있다. PCR은 크게 3가지 단계로 구성되는데, 첫 번째로 합성을 위해 DNA polymerase의 이중 가닥은 단일 가닥으로 분리해주는 Denaturation(DNA변성)하는 단계, 두 번째로 단일 가닥으로 한 가닥의 주형 DNA 가닥에 Primer이 부착되는 과정인 Primer Annealing 단계, 마지막으로 dNTPs와 DNA polymerase를 첨가하고, 단일 주형 DNA에 부착된 Prime이 연장 및 중합 과정을 하는 과정으로 최종적으로 목적 DNA의 증폭 및 복제를 일으키는 Extension 단계다. 해당 단계 별로 증폭 효율에 영향을 미치는 반응 온도 및 Cycle 수 등의 변수들을 고려하여 실험을 진행한다.

참고 자료

‘2020 생물화학공학 이론 및 실험노트’
2020 화요일 생물화학공학 2조 PCR ppt
유민, 김병오, 이혜영, ‘미생물 실험서’, p68~75
Willey, Sherwood, Woolverton, ‘미생물학 제9판’, (주)라이프사이언스, p137~172, p291~423
한국 미생물학회 이건형, ‘Benson's 미생물학실험’, p411-413