LB배지를 이용한 배양 Liquid culture & Expression 결과레포트 [A+]

목차

1. Abstract

2. Experiment
1) 실험 기기
2) 실험 시약
3) 실험 방법

3. Result

4. Discussion

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 액체LB배지에 eGFP DNA가 포함되어 있는 실험군과 포함되어 있지 않는 대조군을 배양시킨 뒤 두 플라스크에 단백질발현 유도물질인 IPTG를 넣어 배양시키고, UV transilluminator를 녹색 형광빛의 발현을 관찰하는 실험이었다. 실험의 결과, eGFP DNA가 포함되어 있지 않은 대조군에서는 녹색의 형광빛이 관찰되지 않은 반면 eGFP DNA를 넣어준 실험군에서는 모든 조에서 녹색의 형광빛이 관찰되었다. 이렇게 eGFP 유전자를 발현시키는 Lac operon의 system에 대해서 알아보고, Cell growth curve와 O.D.의 관계에 대해서도 분석해보았다.

2. Experiment
1) 실험 기기
(1) Autoclave (고압멸균기)
- 멸균하기 위해 사용하는 장치로, 밀폐상태에서 121℃, 15psi의 고압증기를 사용한다.

(2) Shaking incubator (진탕배양기)
- 미생물을 접종한 액체 배지를 흔들어 그 움직임으로 공기 중의 산소의 이동을 촉진시켜 배양하는 장치이다. 이번 실험에서는 호기성 균 및 세포의 배양을 위해 사용한다.

(3) UV spectrophotometer (분광광도계)
- 어떤 물질이 흡수하는 특정한 빛 에너지 스펙트럼을 측정하는 장치로, 이번 실험에서는 Optical Density 측정에 사용한다. 이번 실험에서는 OD의 값이 0.6 이상이 되었을 때 세포가 충분히 배양되었다고 판단할 수 있으며, 이 때 IPTG를 넣어준다.

(4) UV transilluminator
- Cell의 검출 목적 등에 이용되는 기기로, 특정 파장의 UV를 조사해 형광을 일으킨다.

(5) Flask
- 삼각형 모양으로 되어 있으며, 이번실험에서는 시약을 담아 진탕배양기에서 사용한다.

참고 자료

없음