단백질 정량 Protein Assay

목차

1. 실험목적
2. 실험이론
3. 재료및 기구
4. 실험방법
5. 결과 분석 및 디스커션

본문내용

1. 실험 목적
생명체를 구성하는 중요 분자인 단백질을 분자내의 에너지와 빛에너지 사이의 상호작용을 이용해 정량분석을 한다. Bradford법에 의한 단백질의 정량방법을 습득하고, 표준곡선을 작성하고 미지 시료의 단백질 농도를 추정한다.

2. 실험 이론
➀ 분광 법(Spectroscopy)
분자는 외부로부터 빛 에너지를 쪼이면 회전, 진동, 전자 에너지의 분자에너지에 해당하는 일정한 에너지의 파장만을 흡수하게 된다. 또한 분자의 화학결합 상태나 구조적인 특성에 따라 흡수되는 정도가 달라져 서로 다른 흡수 스펙트럼을 나타내게 된다. 이를 분광법(Spectroscopy)이라 한다.

➁ 여러 가지 단백질 정량법
일반적으로 단백질을 정량 하는 데는 3가지의 spectroscopic 방법이 이용 된다. 우리는 이 중에서 Bradford Method를 이용할 것이다.

- Bradford Method
Coomassie Brilliant Blue G-250 염색약이 단백질과 결합함으로써 생기는 파장의 변화를 측정하는 방법이다. 장점으로는 정량 시간이 매우 빠르고 간단하다. 단백질에 매우 특이적으로 측정값이 비교적 정확하며 다양한 단백질에 이용 가능하가. 하지만 Detergent, 지방 등에 의해 간섭을 많이 받는 단점이 있으며, 단백질 마다 Coomassie Brilliant Blue G-250 염색약과 결합하는 정도가 조금씩 다를 수 있는 단점이 있다.

참고 자료

[네이버 지식백과] 쿠마시브릴리언트블루 [Coomassie Brilliant Blue] (생명과학대사전, 초판 2008, 개정판 2014, 도서출판 여초)
[네이버 지식백과]
소혈청알부민 [bovine serum albumin, 血淸, うしけッせいアルブミン, ビ-エス-エイ(BSA)] (농업용어사전: 농촌진흥청, 농촌진흥청)