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Lytic bacteriophage culture(host specific, 숙주특이성)

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최초 등록일
2021.08.20
최종 저작일
2017.06
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목차

1. 제목
2. 목적
3. 방법
4. 결과
5. 결론 및 고찰
6. 참고문헌

본문내용

목적
Bacteriophage의 구조와 life cycle을 이해하고 host specific 특성을 확인해본다.

방법
Spotting assay
1. TSA와 Soft agar (0.8%) 를 멸균한다.
2. 멸균된 TSA를 petri dish에 붓고 굳힌 뒤 20분간 말린다.
3. 45℃의 soft agar에 host bacteria를 106 CFU/ml 이상이 되도록 넣어준뒤 잘 섞어준다.
4. Host bacteria를 넣어준 soft agar 10ml을 TSA 위에 붓고 20분간 굳힌다.
5. 잘 굳은 soft agar 위에 5 μl의 phage liquid를 spotting 한다.
6. Spotting한 phage liquid가 흐르지 않도록 30분간 기다리고, 30분 후에 37℃에서 24시간 배양한다.
7. 4시간 뒤 형성된 plaque를 관찰한다.

참고 자료

일반미생물학 8판, 김영민 외 7인, 라이프 사이언스, 2004, 334~336 p
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