[대학생명과학전공실험] SDS PAGE & Western Blot 실험 보고서

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론
3. 실험 과정
4. 실험 결과
5. 실험 고찰
6. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
- SDS – PAGE and Gel Staining, Western Blot에 대해 알아본다.
- 직접 실험을 진행해 보고 Western Blot의 결과를 해석해 본다.

2. 실험 이론
- Protein electrophoresis
전기이동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 의학에서 단백 전기영동이란 다발성 골수종과 단백질 흡수, 생성 그리고 심각한 장기 질환과 영양 상태의 변화로 인한 단백질 손실에 영향을 주는 기타 상태를 진단하고 감시하는 것을 돕기 위해 검사하는 것입니다. 전기 영동에 의한 단백질 분리는 전하를 띤 분자가 일반적으로 전기장을 가하면 기질/ 매질을 통해 이동한다는 사실에 기반합니다. 전기장에서 단백질이 움직이는 속도는 전기영동 시스템의 여러 요인과 단백질 자체의 특성에 의해 결정됩니다. 언급할 몇 가지 요소는 전기장의 강도, 시스템의 온도, 이온의 pH, 완충액의 농도 등입니다.

Principles of Protein electrophoresis
단백질 전기 영동은 충전된 단백질 분자가 용매를 통해 전기장에 의해 운반되는 표준 실험실 기술입니다. 단백질과 핵산 모두 간단하고 빠르고 민감한 분석 도구인 전기 영동에 의해 분리될 수 있습니다. 대부분의 생물학적 분자는 등전점이 아닌 pH에서 순전하를 띠며 전하 밀도에 비례하는 속도로 이동합니다. 전기장을 통한 분자의 이동성은 다음과 같은 요소에 따라 달라집니다: 자기장 강도, 분자에 대한 순 전하, 분자의 크기와 모양, 이온 강도, 그리고 분자가 이동하는 매트릭스의 특성(예: 점도, 공극 크기). 폴리아크릴아마이드와 아가로스는 전기영동에 일반적으로 사용되는 두 가지 지지 매트릭스입니다. Types of Protein electrophoresis에는 원통형인 rod와 판 형태인 slab가 있다.

참고 자료

The Nobel Prize, “The Nobel Prize in Chemistry 1948 was awarded to Arne Wilhelm Kaurin Tiselius "for his research on electrophoresis and adsorption analysis, especially for his discoveries concerning the complex nature of the serum proteins.”,
https://www.nobelprize.org/prizes/chemistry/1948/summary/, (2021.12.06인출)
LAB TEST ONLINE, “단백전기영동”, https://labtestsonline.kr/tests/ep, (2021.12.06인출)
Thermo Fisher, “Overview of Protein Electrophoresis”,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/protein-biology/proteinbiology-learning-center/protein-biology-resource-library/pierce-proteinmethods/overview-electrophoresis.html, (2021.12.11인출)
화학공학소재연구정보센터, “제 12 장 전기영동 (electrophoresis)”, https://www.cheric.org ›
education › cyberlecture, (2021.12.11인출)
Fisher, “Overview of Protein Electrophoresis”,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/protein-biology/proteinbiology-learning-center/protein-biology-resource-library/pierce-proteinmethods/overview-electrophoresis.html, (2021.12.11인출)
Thermo Fisher, “Overview of Protein Electrophoresis”,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/protein-biology/proteinbiology-learning-center/protein-biology-resource-library/pierce-proteinmethods/overview-electrophoresis.html, (2021.12.11인출)
BiteSizeBio, “How to transfer one SDS-PAGE gel onto two membranes”,
https://bitesizebio.com/7846/how-to-transfer-one-sds-page-gel-onto-two-membranes/,(2021.12.11인출)
Biocompare, “Protein Gel Staining”, https://www.biocompare.com/Lab-Equipment/7272-Protein-Gel-Staining/, (2021.12.11인출)
위키피디아, “위스턴 블랏”,
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%9B%A8%EC%8A%A4%ED%84%B4_%EB%B8%94%EB%9E%8F, (2021.12.11인출)
ThermoFisher, “Labeling and Detection Information”,
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/cell-analysis/cell-analysislearning-center/labeling-detection-information.html, (2021.12.11인출)
Al-Amoudi, MS; 살만, 마흐무드; Al-Majthoub, MM; Adam, Abdel Majid A.; Alshanbari, Naif A.; Refat, Moamen S, 「태양 전지에서 사용하기 위한 전하 이동 반응에 의해 레이저 염료의 효율성과 안정성을 증가시키기 위한 스펙트럼 연구: p-클로라닐, 클로라닐산 및 피크르산과 Ponceau S의 전하 이동 착물」. 화학 중간체 연구. 41(5): 3089–3108.
위키피디아, “Ponceau S”, https://en.wikipedia.org/wiki/Ponceau_S#cite_note-3, (2021.12.11인출)
ScienceDirect, “Antibody Specificity”, https://www.sciencedirect.com/topics/medicineand-dentistry/antibody-specificity, (2021.12.11인출)