[분자세포생물학 실험 A+ 예비 및 결과보고서] Cell culture & transfection

소개글

"[분자세포생물학 실험 A+ 예비 및 결과보고서] Cell culture & transfection"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 제목

2. 실험목적

3. 이론
1) Cell culture
2) Cell counting
3) Sub-culture
4) DNA transfection

4. 시약 및 실험 방법

5. 실험 결과
1) 실험 과정 사진 및 설명
2) transfection efficiency 예상치
3)전체 결과 표 및 정량적 그래프 (Figure 6 and table 1)
4) Cell density에 따른 YAP 발현 위치 차이 비교

6. 토의

7. 참고문헌

본문내용

Cell culture & transfection

Purpose
세포배양에 대한 기초 지식을 습득하고 이를 바탕으로 세초를 배양하는 것을 익히고 외부 DNA를 세포내로 주입하기 위한 원리를 이해한다. 그리고 transfection 효율을 cell imaging을 통해 형광을 관찰하여 측정해본다.

Introduction
3.1 Cell culture
Cell culture란 특정 세포를 배양하는 것으로 세포를 보존, 보관과 실제 in vitro 실험에 사용하기 위한 목적으로 혈청과 영양분으로 구성된 인공 배지에서 세포를 키우고 세포의 성장을 확인하는 것을 말한다. 세포배양기술은 대략 4가지로 구분할 수 있다. (1) 우선 동물 세포(mammalian cell) 배양의 경우 실험용 동물의 조직에서 in vivo로 추출하여 사용하며 이때 세포를 떼어내어 처음 배양하는 것을 primary cell culture라고 한다. 이것은 post mitotic cell이자 differentiated cell이다. (2) 두 번째로 replicating cell culture 방법으로 fibroblast를 주로 사용한다. 이것은 non-differentiated cell로 분화할 수 없지만, 분열 가능한 세포를 활용한다 (3) cell line(세포주)을 사용하는 경우이다. 이는 immortalized cell로서 한정된 수명을 가지지 않는 유사분열기 세포이며 대표적으로 HeLa cell line이 있다. (4) 마지막으로 stem cell이 있다. 이것은 un-differentiated cell이며 self renewal 할 수 있는 능력을 갖추고 있는 cell을 사용하여 배양한다. Cell은 크게 adherence cell과 suspension cell로 구분할 수 있다. 보통 많은 cell line은 adherence cell로 접착을 통해 세포가 성장하고 확산이 가능하다.

참고 자료

Current Protocols in Chemical Biology, 147–157. (2017)
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/31985062#/31985062
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/11668019#/11668019
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0100974