ELISA 실험보고서

소개글

이화여자대학교 생명과학실험3 첫번째 실험 ELISA 레포트

목차

1. Introduction
1) Immunoglobulin
2) B cell maturation
3) Humoral response
4) Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
5) Purpose
6) 실험할 ELISA 에 대한 모식도

2. Materials

3. Method

4. Results

5. Discussion

6. Reference

본문내용

② 1~6 well α-IgM (2ug/ml), 7~12 well α-IgG (2ug/ml)을 100λ 넣고 RT 에서 30min
③ 안에 내용물 버리고 PBS-T 3 회 washing (같은 양의 PBS-T 가 well 당 들어가게 함. 기
포는 없어야 함.)
④ 3% BSA in PBS-T 인 blocking buffer 100λ 넣고 RT 에서 20min
⑤ Standard 1 의 dilution 을 통해 standard 7 까지 만듦.
a. Standard 1 초기 농도 250ng/ml, standard 2~7 ep-tube 에는 3% BSA buffer 360λ
미리 넣음.
b. Standard 1 에서 120λ 따서 standard 2 에 넣고 vortexing
c. Standard 2 에서 120λ 따서 standard 3 에 넣고 vortexing. 이 작업을 standard 7 까
지 하고 standard 7 에서 딴 120λ 는 버림.
⑥ 기다리는 동안 -20℃ 보관 중이던 sample 들을 tapping 으로 녹이고 centrifuge
⑦ Label 을 보고 해당하는 well 에 blank 와 standard 100λ (standard 7 번부터, standard 1
의 경우 고농도여서 반응이 빨리 일어나 나중에 넣는 것이 시간 차를 줄일 수 있음.)
Label 을 보고 해당하는 well 에 sample 을 90λ 넣음. (정량은 standard 와 같은 100λ을
넣어야 하지만, cell 에서 딴 sup 의 양이 200λ가 되지 않아 90λ씩 넣음.)
RT/30min/shaker(slow)
⑧ Well 에 있는 내용물을 버리고 PBS-T washing 3 회

참고 자료

A. Rosenspire, P. Stemmer,
5.17 Antigen Specific Signal Transduction, 2010, Pages 323 349
Britannica, The Editors of Encyclopaedia. "antibody". Encyclopedia Britannica, 27 Aug. 2021
Janeway CA Jr, Travers P, Walport M, et al. Immunobiology: The Immune System in Health and
Disease. 5th edition. New York: Garland Science; 2001.