[생명과학실험 레포트]_SDS-PAGE를 이용한 단백질의 분석 A+레포트 입니다.

소개글

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목차

1. 제목
2. 요약
3. Introduction
4. Material & Method
5. Result
6. Discussion
7. Reference

본문내용

1. 제목
SDS-PAGE를 이용한 단백질의 분석

2. 요약
1) Poly arcylamide gel 만들기
2) gel을 이용하여 SDS-PAGE와 Coomassie blue staining을 통해 원하는 AP단백질을 분석하기

3. Introduction
 SDS의 역할 및 SDS-PAGAE 실험 원리
-SDS (Sodium dodecyl sulfate)의 역할: CH3-(CH2)11-OSO3Na
SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다.
(* dodecyl - 탄소수가 12개인 알킬기,* sulfate - 황산이온과 결합된 염,* Salt (염) - 산염기 반응에 의해 생성된 물질)
-PAGE (Poly arcylamide gel electrophoresis)의 역할
PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다.
arcylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교제의 농도 및 비율에 의해 gel내 미세통로의 크기를 조절할 수 있어 다양한 크기의 생체 분자들을 분리할 수 있을 뿐만 아니라 높은 정밀도와 고분해능으로 널리 사용되고 있다.
Polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 가능기가 N,N'-methylene bisacrylamide와 같은2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 비가역적으로 중합되어 형성된 polymer이다. acrylamide의 중합은 ammonium persulfate (APS)첨가에 의해 개시되고 이때는 촉매제로 TEMED를 사용하여 persulfate로부터 자유라디칼의 생성을 촉매함으로써 중합을 개시한다.

참고 자료

SDS-PAGAE : 생화학분자생물학회, 생화학백과, 생화학분자생물학회, 2019, 1193
Acrylamide-bisphosphate : 양성렬, 인체생화학, 포널스출판사, 2015, 27-28
APS : UNIDO and International Fertilizer Development Center (1998), Fertilizer Manual, Kluwer Academic Publishers, ISBN 0-7923-5032-4.
TEMED: Henderson, K. W.; Dorigo, A. E.; Liu, Q.-L.; Williard, P. G. (1997). “Effect of Polydentate Donor Molecules on Lithium Hexamethyldisilazide Aggregation: An X-ray Crystallographic and a Combination Semiempirical PM3/Single Point ab Initio Theoretical Study”. 《J. Am. Chem. Soc.》 119: 11855.
Tris-HCl : Gomori, G., Preparation of Buffers for Use in Enzyme Studies. Methods Enzymology., 1, 138-146 (1955).
Resolving, Stacking gel : “SDS PAGE,” Biotechnologist J.S.Park, last modified Jan 20, 2013, accessed Apr 1, 2021.
Coomassie blue staining : Fox, M. R. (1987). 《Dye-makers of Great Britain 1856-1976 : A History of Chemists, Companies, Products and Changes》. Manchester: Imperial Chemical Industries. 38쪽.