단백질 정량분석 예비레포트 [논문참고, A+ 1등]

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목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 실험 기기 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
● UV법, Lowry법, BCA법, Bradford 법 등 여러 단백질 정량 분석법을 이해하고 비교할 수 있다.
● Lowary법을 이용해 제조한 BSA 용액의 흡광도를 측정해 최적 파장대를 설정함으로써 BSA standard curve를 도출 할 수 있다.
● UV 분광광도계의 사용법을 숙지한 뒤, 미지의 단백질 용액들의 흡광도를 측정하고 BSA standard curve와 비교함으로써 시료의 농도를 구할 수 있다.

2. 바탕 이론
(1) 단백질(Protein)
아미노산은 단백질을 구성하는 기본 단위로 아미노기()와 카복시기()를 포함한 모든 분자를 지칭하며 화학식은 이다. 아미노산은 아미노기와 카복시기가 탈수축합 반응(물 분자를 내놓으면서 축합)을 통해 의 형태로 결합하는 펩타이드 결합을 형성한다.

약 20가지의 다른 아미노산들이 펩타이드 결합에 의해 길게 연결되어 ‘폴리펩타이드‘라는 단일 선형 사슬 구조를 이룬 뒤, 이 사슬이 4차 구조를 이루어 고유한 기능을 가지게 된 것을 ’단백질’이라 부른다. 즉, 아미노산의 공유결합으로 구성된 중합체이다. 단백질은 몸에서 물 다음으로 많은 부분을 차지하며 효소, 호르몬, 항체 등 주요 생체 기능을 수행하고 근육 등의 체조직을 구성한다.

(2) 단백질 정량 분석
시료에 포함된 단백질의 양적 관계를 확인하기 위해 실행하는 정량 분석으로 많은 생ㆍ화학 실험의 기본이 되며 여러 방법이 존재한다. 대표적인 방법으로는 UV법, Lowry법, BCA법, Bradford 법 등이 존재하며 각 분석법의 특징은 아래와 같다.

① UV 분석법
단백질 용액의 흡광도를 분광광도계로 측정하는 방법으로 단백질을 구성하는 아미노산 중 방향족 고리를 지닌 티로신(Tyr)의 페놀 그룹과 트립토판(Trp)의 인돌 고리 등이 파장이 280n인 자외선을 잘 흡수한다는 점을 이용한다. 의 양을 측정할 수 있으며 Lambert – Beer’s Law에 의해 흡광도와 시료의 단백질의 농도는 비례한다.

참고 자료

22년도 2학기 화공기초 이론 및 실험 실험노트
“BCA 정색반응을 이용, 새로운 세포독성 분석법 개발과 항암제 탐색을 위한 그 이용“, 8P / 조영호 / 1992
MSDS
“단백질 정량을 위한 형광 염료의 합성, 특성에 대한 연구”, p 5~15 / 전현숙 / 2004
“생화학실험서”, p. 215~216 / 김해신 / 2014