western blot 생물 실험 예비 보고서

소개글

A+ 받은 보고서입니다. 그림과 표가 잘 정리되어 있습니다.

목차

1. 개요
2. 실험재료 및 방법

본문내용

1. 개요
Western blot과 면역염색법(immunostaining)은 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정단백질을 찾아내는 기법으로서 찾고자 하는 단백질에 대한 항체를 사용하여 항원-항체 반응을 일으킴으로써 특정단백질의 존재여부를 밝혀낸다. 여러단백질을 SDS, urea 또는 2-mercaptoethanol과 같은 환원제로 용해시킨 후 SDS-polyacrylamide gel 전기영동한 후 Coomassie brilliant blue로 염색하여 전기영동으로 분리된 단백질 대(band)를 확인하거나 nitrocellulose 또는 nylone membrane에 옮긴 후(단백질을 옮기는 이 과정을 western blot 또는 western transfer라고 한다) 단백질이 옮겨진 membrane에서 항원-항체 반응을 이용 특정 항체에 대한 항원(단백질)을 찾아내는 기법이다.

이때 사용하는 항체는 찾고자 하는 항원(단백질)에 대해 특이하게 반응하는 것을 방사성 동위원소로 표식하여 사용하거나 또는 특정 효소(예: alkaline phosphatase, horseradish peroxidase 등) 또는 형광을 나타내는 색소(예: FITC: fluorescein isothiocyanate)를 결합시킨 것을 이용함으로서 찾고자 하는 적은 양의 단백질을 가시화할 수 있다.

참고 자료

없음