동물의 인공수정 및 Micromanipulator 조작 실험

소개글

동물의 인공수정 기법 중 Micromanipulator의 조작을 익힌다.
그에 따르는 실험목적 방법 결과 고찰등을 소개한다.

목차

1. 실험목적
2. 실험 내용
3. 실험재료
4. 실험방법
-Micromanipulation
-Micromanipulator
-회수된 난의 핵 이식 두가지 방법
(1) 돼지 난의 회수
(2) 미세조작 기계를 사용하여 미세주입용 피펫(injection pipette)과
고정용 피펫(holding pipette) 제작
(3) 회수된 난의 미세주입

5. 실험 결과 및 고찰

본문내용

1. 실험목적
미세조작 기계를 사용하여 미세주입용 피펫(injection pipette)과 고정용 피펫(holding pipette)을 제작하여 미세주입을 해 볼 수 있다

2. 실험 내용
① 돼지 난의 회수
② 미세조작 기계를 사용하여 미세주입용 피펫(injection pipette)과 고정용 피펫(holding pipette) 제작
③ 회수된 난의 미세주입

3. 실험재료
① 실험동물 : 돼지 난소
② 실험기구 및 시약 : 미세조작기(Micromanipulator), pipette제작기구(puller, grinder), hyaluronidase, 70% alcohol, 주사기, 현미경, Petri dish, 가위, pincet

4. 실험방법
⊙ 실험의 원리
-Micromanipulation : 미세조작기 부착 도립현미경하에서 포유동물의 세포괴 절단, 분리하거나, 세포의 일부를 제거하기도 하고, 세포내에 다른 세포구성분을 삽입, 주입하는 등의 모든 조작 – 미세조작 실시 후에도 세포는 생존, 발달을 계속할 수 있어야 한다

① 제거조작 – 세포의 일부 제거하거나, 배의 일부 제거
② 주입조작 – 세포의 세포질이나 핵, 배의 위란강이나 배반포강 등에 세포구성분이나 색소, 세포 자체 를 주입
③ 분리, 절단조작 – 초기배의 분할구 분리하거나 배차체 절단
④ 집합조작 – 복수의 상이한 세포, 할구 집합시켜 융합체 작성

-Micromanipulator
① 미세피펫, 미세칼, 미세침 등과 같은 도구를 부착하여 각종 세포나 초기배 조작 장치. 재물대 위에 넓은 공간이 확보되는 inverted microscope에 장착하여 사용
② 레바를 조작하여 작동
* 유압식 – 미세조작기구가 부착된 작동부분과 손으로 작동부분을 조작하는 조종레바 사이를 합성수지로 만들어진 3개의 관이 연결. 하나의 조종레바로 수평면의 이차원동작에 상, 하 방향을 합친 삼차원동작으로 조절할 수 있으며, 또한 원격조작이기 때문에 레바조작에 의한 진동이 현미경에 전달되지 않음

참고 자료

동물인공수정과 수정란 이식/서경덕/선진문화사