Real-time RT-PCR을 이용한 Feline Calicivirus 불활성화의 정량적 분석
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서지정보
ㆍ발행기관 : 한국식품위생안전성학회
ㆍ수록지정보 : 한국식품위생안전성학회지 / 29권 / 1호
ㆍ저자명 : 정혜미, 김광엽
ㆍ저자명 : 정혜미, 김광엽
목차
ABSTRACT재료 및 방법
세포배양
바이러스
Plaque assay
Standard curve 산출
물리, 화학적 위생처리를 통한 FCV의 불활성화
Viral RNA 추출
RT-PCR
Real-time RT-PCR
불활성화 효율 계산
결과 및 고찰
Plaque assay
Standard curve
물리적 위생처리
화학적 위생처리
요 약
참고문헌
영어 초록
Norovirus causes acute gastroenteritis in all age groups and its food poisoning outbreaks are rapidly increasing in Korea. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) is most widely used for the rapid detection of foodborne viruses due to high sensitivity. However, the false positive results of RT-PCR obtained against already inactivated viruses could be a serious drawbacks in food safety area. In this study, we investigated a method to yield true positive RT-PCR results only with alive viruses. To decompose the RNA genes from dead viruses, the enzymatic treatments composed of proteinse K and Ribonuclease A were applied to the sanitized and inactivated virus particles. Another aim of this study was to quantify the efficiencies of several major sanitizing treatments using realtime RT-PCR. Feline calicivirus (FCV) that belongs to the same Caliciviridae family with norovirus was used as a surrogate model for norovirus. The initial level of virus in control suspension was approximately 104 PFU/mL. Most of inactivated viruses treated with the enzymatic treatment for 30 min at 37oC were not detected in RT-PCR, Quantification results to verify the inactivation efficiencies of sanitizing treatments using real-time RT-PCR showed no false positive in most cases. We could successfully develope a numerical quantification process for the inactivated viruses after major sanitizing treatments using real-time RT-PCR. The results obtained in this study could provide a novel basis of rapid virus quantification in food safety area.참고 자료
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