MTT assay

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※ MTT assay의 원리
미토콘드리아는 세포 내에 에너지를 공급하는 기관으로 미토콘드리아가 파괴 된다면 ATP가 생성되지
않기 때문에 세포가 죽게 된다. 살아있는 세포에 MTT를 처리하게 되면, MTT가 미토콘드리아에 있는
reductase에 의해 환원되어 formazan이라 불리는 crystal을 형성하게 된다. 죽은 세포에서는 이미 미토콘드리아가 깨져 없어, reductase도 존재하지 않기 때문에 formazan도 형성되지 않는다.
- 어떤 화합물을 농도별로 일정 시간 처리해서 세포의 사멸을 충분히 유도한 뒤 MTT를 처리하면 세포
독성이 나타나지 않는 낮은 농도에서는 formazan이 형성되고 높은 농도에서는 formazan이 형성되지
않는 것을 확인할 수 있다.
- MTT formazan 의 흡광도는 540nm 파장에서 최대가 되고, 이 파장에서 측정된 흡광도는 대사가
왕성한 살아있는 세포의 농도를 반영한다.
- 측정할 well의 세포의 농도가 너무 낮거나 높은 범위에 있으면 살아있는 세포의 농도와 흡광도
사이의 직선적인 비례관계가 성립되지 않게 되므로 최적의 세포농도를 결정하는 과정이 필요하다.

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