MTT assay

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Ⅰ. Introduction
1. 실험원리
1) 세포 독성 시험(Cytotoxic test)
어떤 표적 세포에 세포표면의 항원에 대한 특이항체와 보체를 반응시킨 경우에 생기는 세포막의 투과성 변화, 핵의 손상을 포함한 표적세포의 상해를 세포 밖에서 측정하여 그 활성을 평가하는 시험이다.

-Tetrazolium salt
Tetrazolium salt는 3개의 aromatic ring이 연결된 heterocyclic compound의 통칭으로mitochondria 내에서 enzyme에 의해 metabolize 되어 formazan이라는 물질을 생성한다. 이것을 녹이면 색깔을 띄므로 이 formazan의 양을 absorbance로 정량적으로 측정할 수 있다는 점을 이용하여 cell의 proliferation 정도를 측정한다. 주로 이용되는 tetrazolium salt로는 MTT, XTT, MTS, WST-1 등이 있다.

2) MTT assay (MTT = 3- (4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide)
세포 독성을 측정하는 실험법 중 하나로 MTT(노란색)가 효소(mitochondrial succinate dehydrogenase) 반응에 의해 formazan(보라색)으로 환원되는 정도를 색의 변화로 판별하는 실험법이다. Sample 처리 후 MTT를 분주하면 MTT는 cell 내부로 들어가 mitochondria에서 insoluble 형태로 환원이 된 formazan을 만들게 된다.

참고 자료

박상대, 분자세포생물학, 아카데미서적, 1998, p.12-13
조문구, 배양공학, 유한문화사, 2004, p.195
Wikipedia ‘Ethyl Alcohol’

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