BCA assay

목차

1. 실험제목 (Subject)
2. 실험원리(Principium)
3. 실험재료 및 기구 (Materials and Apparatus)
4. 실험방법 (Methods)
5. 실험결과 (Results)
6. 고찰 (Discussion)

본문내용

1. 실험제목 (Subject)
- BCA법에 의한 단백질의 정량 (Test Tube proocol, Sample to WS radio = 1:20)

2. 실험원리(Principium)
-BCA Assay: 현재 Bradford Assay와 함께 가장 많이 쓰이고 있는 단백질 정량방법이다. Lowry assay를 개량한 방법으로 Folin 시약 대신 bivinhoninate(BCA)를 사용한다는 차이점이 있다. 단백질이 구리 이온 Cu2⁺, Cu1⁺을 환원 시킬 수 있는 성질을 이용한다. 2가의 구리이온은 단백질의 펩티드 결합과 접하게 되면 1가의 이온으로 환원되는데, 이를 Biuret reaction이라고 한다. 뷰렛반응의 의한 구리이온의 환원은 단백질의 양과 비교적 정량성을 보이는데, 이렇게 형성된 구리 이온이 다시 BCA와 정량적으로 결합하여 BCA-Cu⁺ complex를 형성하게 된다. 단백질에 의해 환원된 구리 이온은 BCA용액과 반응을 해서, 보랏빛의 화합물을 생성하게 된다.

참고 자료

[Koram Lab-Tech 홈페이지] 실험 프로토콜 – Protein Assay(BCA Method)
[Labome 홈페이지] Protein Quantitation