생화학] 단백질 정제 예비보고서
- 최초 등록일
- 2019.11.05
- 최종 저작일
- 2018.07
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목차
1. 단백질 정제란
2. 단백질 정제 목적
3. 단백질 정제 방법
1)원심분리법
2)겔 여과법
3)이온교환 크로마토그래피
4)등전점 전기영동
5)친화 크로마토그래피
본문내용
1. 단백질 정제란
단백질은 비교적 단순한 분자들이 연결되어 만들어진 복잡한 분자이고 단백질을 이루고 있는 아미노산 종류 약 20가지이다. 이 아미노산들이 화학결합을 통해 다양한 구조를 만들고 다양한 구조만큼 다양한 기능을 가지고 있다. 단백질은 세포 내의 각종 화학반응의 촉매 역할이나 산소, 이온의 운반 그리고 세포대사 조절 등의 기능을 하는데 생명현상을 이해하기 위해선 세포를 구성하는 단백질의 각 구조와 기능을 이해하는 것이 필수적이다. 그러나 단백질은 복합 혼합물이기 때문에 각각 의 구조와 기능을 연구하기 위해서는 우선적으로 연구하고자 하는 단일 타입의 단백질로 분리해야 한다. 즉 단백질 정제는 복합 혼합물로부터 단일 타입의 단백질을 분리하는 일련의 과정들이다. 단백질 정제의 시작물질은 보통 생체조직 혹은 미생물 배양체인데 단백질을 생체조직 혹은 미생물 배양체에서 용해 후 단백질을 추출하고 단백질 안정화과정 후 각종 구성성분 또는 혼합물로부터 각각의 성분 또는 특정의 그룹으로 분리, 조작하는 분획을 거치게 된다.
2. 단백질 정제 목적
단백질을 정제는 가능한 최고의 회수율을 내고 최고의 생물학적 활성을 유지하며 최고의 순도를 나오게 하는 것에 있다. 목적을 달성하기 위해서는 우리가 정제하고자 하는 단백질을 선택적으로 측정할 수 있는 지 등의 특이성을 고려해야한다. 또한 시료의 농도의 정도에 따라 측정이 다를 수 있기 때문에 민감도를 생각해야한다. 그리고 재현성을 고려해야하며 검사법이 편하고 간편한 장비만으로도 시행할 수 있어야하고 이 모든 검사소요 경비가 저렴해야 한다.
3. 단백질 정제 방법
단백질 정제 방법은 매우 다양한데 첫 번째는 밀도에 따라 분리하는 원심분리법, 겔 여과법, 투석여과법이 있고 두 번째는 전하에 따라 분리하는 이온 교환 크로마토그래피, 전기영동, 등전점전기영동 있으며 세 번째는 용해도 차이에 따라 분리하도록 ph를 바꾸는 방법, 이온의 강도를 바꾸는 방법, 유전상수를 바꾸는 방법 등이 있다.
참고 자료
없음