결과-단백질 정량 분석

목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion

본문내용

1. Abstract
본 실험에서는 여러 가지 단백질 정량 분석 방법을 이해하고, 그 중 하나인 Lowry method를 통해 다양한 단백질 시료를 분석하고자 한다. 총 5가지 농도의 단백질 시료를 제작하고, Lowry method를 적용시켜 흡광도를 통해 각각의 농도를 측정한다. 또한 앞선 측정 결과를 이용해 BSA curve와 error bar를 표시하고, 미지의 단백질 시료의 농도를 예상하는 실험을 진행한다.
실험 결과는 3-(1)Result에서 알 수 있듯이 최적 파장대는 750nm, 계산 결과 미지의 단백질 시료의 농도는 약 166.57μg/ml로 계산되었다. 최적 파장대에서 standard curve를 그렸을 때 값은 0.9463로 매우 낮은 신뢰도가 나타났다. 이는 많은 실험 과정 상의 오류가 나타났음을 알 수 있으며, 3-(2)Discussion에서 이러한 오차 원인에 대해 분석해보고자 한다.

< 중 략 >

(3) 실험 방법
① 미리 준비된 BSA원액(2mg/ml)을 희석하여 5가지 농도의 BSA샘플을 제조한다. 희석된 비율은 아래 Table.1에 나타내었다.
② 제조된 BSA샘플 200μl에 Lowry reagent 1ml첨가 후 pipetting하여 잘 혼합시킨다. 그 후 상온에서 20분간 반응시킨다.
③ 1/2비율로 희석시킨 Folin&Ciocalteu’s Phenol reagent 100μl를 가한 후 기포가 생기지 않도록 pipetting한다.
④ 30분간 색 변화를 관찰한다.
⑤ 600 650 700 750 800 850 900nm의 파장에서 각 용액의 흡광도를 측정하고, 최적의 파장대를 찾는다.
⑥ BSA standard curve와 error bar를 나타낸다.
⑦ 준비된 미지의 단백질 시료를 이용해 실험방법 ②~④을 반복한 후 최적의 파장대에서의 흡광도를 측정하여 농도를 예측한다.

참고 자료

2018 2학기 화공 기초 이론 및 실험2 실험 노트
https://blog.naver.com/withcoffee67/70157518737
김해신, 2014, “생화학실험서”, 월드사이언스, 215-216p