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PCR 및 전기영동 (PCR and Agarose Gel Electrophoreisis)

이선표
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최초 등록일
2020.10.10
최종 저작일
2020.10
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소개글

"PCR 및 전기영동 (PCR and Agarose Gel Electrophoreisis)"에 대한 내용입니다.

목차

1. Title

2. Date

3. Object

4. Introduction
4-1. PCR
4-2. Agarose gel electrophoresis

5. Materials & Methods
5-1. Materials
5-2. Methods

6. Results
6-. Results 이미지
6-2. Results 분석

7. Discussion

본문내용

1. Title
PCR 및 Electrophoresis

2. Date
2020. 09. 24. Thr

3. Object
- PCR의 목적 및 방법을 이해한다.
- Electrophoresis를 통해 PCR의 결과를 확인한다.

4. Introduction
4-1. PCR
- 정의
중합효소 연쇄반응(Polymerase Chain Reaction)의 약어로, DNA의 원하는 부분을 복제, 증폭시키는 분자생물학적인 기술을 의미한다. Target으로 사용하는 DNA의 크기, 종류 또는 실험의 목적 등에 따라 다양한 종류로 세분화 되어있다.

- 조성 및 역할
PCR을 일으키기 위해서 필요한 물질들은 다음과 같이 구성되어있다. Template, Primer, DNA polymerase, dNTP.
Template는 Target DNA를 의미하며, 실험에서 증폭시키고 싶어하는 주형 DNA를 의미한다. Primer는 주형 DNA 가닥 중 실질적으로 증폭시키려 하는 부위에 결합하여 DNA replication이 시작되고, 종료되는 시점을 제공한다. 이 때, 시작 부위를 결정하는 primer를 F-primer(Forword primer), 종류 부위를 결정하는 primer를 R-primer(Reverse primer)라고 한다. DNA polymerase는 DNA를 합성하는데 관여하는 enzyme으로, PCR 초기 과정 당시에는 Klenow polymerase를 사용하였다. 그러나 이 enzyme은 PCR의 단계 중 Denaturation에서 필요한 고온의 열에 변성되었고, 이후 Thermophilus aquaticus의 polymerase인 Taq polymerase를 사용하는 것으로 보완되었다. dNTP는 deoxynucleoside triphosphate의 약어로, DNA 합성의 재료로 사용되며, 결홥되어있는 염기에 따라 dATP, dGTP, dCTP, dTTP로 구별된다.

참고 자료

Google. “PCR”
Google. “PCR 종류”
“세포생물학개론 4th”. 홍승환 외. 2016. 교보문고
Google. “PCR buffer 역할”
Google. “PCR 최소 volume”
Google. “primer Tm 값”
Google. “PCR 유의사항”
Google. “Post extension PCR”
Google. “TAE TBE buffer”
Google. “Electrophoresis”
Google. “agarose gel electrophoresis 원리”
Google. “DNA dye”
이선표
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