아주대학교 생물학실험1 DNA 추출 실험 결과보고서

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목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론
1) Plasmid(플라스미드)
2) DNA 추출 기법
3) DNA 전기 영동

3. 실험 준비물
1) Plasmid DNA 추출
2) 전기영동

4. 실험 방법
1) Plasmid DNA 추출
2) DNA 전기영동

5. 실험 결과

6. 실험 고찰

본문내용

1. 실험 목적
DNA의 구조 특성을 이해하여 플라스미드라는 염색체 이외의 자가복제 DNA의 분리를 통하여 DNA의 추출 및 정제 방법의 원리를 배우고, DNA의 이화학적 특성을 이해한다.

2. 실험 이론
1) Plasmid(플라스미드) : 세균의 세포내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 자를 총칭. 세균의 생존에 필수적이지는 않으며, 다른 종의 세포 내에도 전달될 수 있다. 이런 성질을 이용하여 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 자른 뒤 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.

(1) Plasmid의 형태
- Supercoiled DNA : 이중가닥의 plasmid DNA가 끊어지지 않고 초나선으로 꼬 여 뭉쳐져 있는 상태로, 세균으로 분리된 plasmid DNA는 대부분 이 형태로 존재한다.
- Open-circular DNA : 환상형(circular)의 이중가닥 plasmid DNA 중 한쪽 가닥이 끊어져 있는 형태인 열린 원형 상태
- Linear DNA : plasmid DNA의 이중가닥이 모두 끊어져 양 끝이 존재하는 형태.

(2) Plasmid 추출 기법
- 크기 차이를 이용하는 정제기법 : cell을 라이소자임, EDTA, 25% sucrose로 세 포벽을 허물어준다. 25% sucrose는 등장액 역할로 cell 및 bacteria가 깨지지 않게 유지해준다. 세포벽이 허물어진 cell에 Triton X-100을 이용하여 cell extract한다. Triton X-100대신 SDS solution을 사용하기도 하며, cell membrane 을 와해시켜 세포 내부의 물질들을 용출한다. 마지막으로 원심분리로 세포벽 과 무거운 DNA 조각들을 가라앉히고 상층액에는 플라스미드만 남긴다.

참고 자료

생명의 원리, 데이비드 힐스 외 3인, 라이프 사이언스, 136p
일반생물학 실험, 남석현 외 1인, 범문에듀케이션, 121-127p