RNA 추출 실험 레포트

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목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Materials
6. Methods
7. Results
8. Discussion
9. Projects
10. References

본문내용

4. Purpose : Kit를 이용하여 Rat 조직으로부터 RNA를 분리해본다..

5. Materials : liver tissue sample, ep tube, centrifuge, pipette, tip, RLT buffer, beta-mercaptoethanol, homogenizer, ice, 70% ethanol, RNeasy mini kit, RW1 buffer, RPE buffer, RNase-free water

6. Methods :
① rat의 liver tissue sample로부터 약 30mg을 떼어내어 ep tube에 담는다.
② sample이 담긴 ep tube에 homogenize를 위해 beta-mercaptoethanol이 함께 첨가된 RLT Buffer를 600ul 첨가한다.
③ ice상태에서 rotor-stator homogenizer를 이용하여 물리적으로 homogenize시킨다.
④ lysate를 약 3분간 full speed(13,000rpm)에서 원심분리 시킨 후, supernatant만을 분리한다.
⑤ 얻어진 supernatant와 동일한 양의 70% ethanol을 첨가한 후 잘 섞이도록 pipetting한다.
⑥ 700ul의 ⑤를 RNeasy mini kit에 넣은 후 15초간 10,000rpm이상에서 원심분리 시킨다.
⑦ RNeasy mini kit에 RW1 buffer를 700ul첨가한 후 15초동안 10,000rpm에서 원심분리 시킨 후, wash되어 collection tube로 빠져 나온 용액은 버린다.

참고 자료

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