[분자생물학실험 레포트] Gene cloning 실험 보고서

소개글

분자생물학실험을 수강해 작성한 gene cloning 실험 레포트입니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1.실험목적
Cloning은 유전 공학의 기초가 되는 기술로, 특정 DNA조각을 분리하여 벡터(vector)라고 불리는 플라스미드 혹은 바이러스 같은 작고 간단한 유전요소로 옮긴 후 이를 살아있는 생명체에 다시 도입하여 특정 유전자를 순수한 형태로 분리하거나 다양하게 이용을 하는 기술이다. Gene clonig으로 DNA 를 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 DNA(recombinant DNA)를 제조하고 Southern, Northern, cell culture 실험 등에서 사용해야 할 생체 내 유전자를 얻을 수 있을 뿐 아니라 기본적인 효소의 처리와 DNA의 분리 및 조작방법을 배울 수 있다. 이번 실험을 통해 gene cloning 과정을 알아보고 우리가 원하는 insert 유전자가 삽입된 재조합 vetor를 만들 수 있다.
1) Enzyme digestion and gel loading
: Colning을 하기 위해 vector와 insert를 제한효소로 자를 수 있다.
2) Gel extraction and ligation
: 자른 DNA를 agarose gel로부터 purification을 통해 분리할 수 있다.
: vector와 insert를 T4 DNA ligase를 가지고 ligation할 수 있다.
3) Transformation
: ligation 시킨 plasmid를 competent cell에 transformation할 수 있다.
4) DNA prep
: transformation한 colony에서 DNA를 얻어서 enzyme digestion을 통해 ligation이 제대로 이루어졌는지 확인 할 수 있다.
2.실험원리
이번 실험에서는 우리가 원하는 insert dna를 plasmid에 재조합 시키기 위해 준비된 insert유전자와 plasmid를 제한효소로 자른 뒤 전기영동 하여 확인해 본 후 ligation과 transformation을 거쳐 재조합 하여 형질전환 시킨뒤 E.coli를 배양시켰다. 그 다음 성공적으로 재조합 되었는지 확인해 보기 위하여 insert와 plasmid에 존재하는 제한효소로 자른 뒤 전기영동하여 확인하여 보았다.

참고 자료

https://blog.naver.com/skinscience/220401120319
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/sub/catalog.php?CatNo=13&gene=intro