'SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석' 실험레포트

소개글

SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석 관련 실험레포트입니다.
SDS의 특징과 SDS-PAGE GEL 제조법과 시료의 역할, method, 결과값 해석, 의문점 등을 상세히 적어두었습니다. 해당 실험실 분반 레포트 점수 1등한 자료입니다.
레포트 쓰는데 참고하시면 도움 되실거에요 :)

목차

1. Introduction
1) SDS
2) Gel에 들어가는 시료의 역할
3) Resolving gel 과 Stacking gel의 차이
4) Coomassie blue

2. Materials

3. Method
1) polyacrylamide gel 만들기
2) SDS-PAGE & Coomassie blue Staining

4. Result

5. Discussion

6. References

본문내용

[1] Introduction

{1} SDS
-역할 : 다양한 전하의 단백질들을 음전하로 균일하게 코팅시키고 선형의 polypeptide chain형태로 변성시켜 전기영동시 모양이나 전하의 영향없이 크기(분자량)로만 분리될 수 있도록 만든다. (전기영동시 분자의 속도 ‘ v=Eqf ’에서 마찰계수 f중 분자량만 변수가 됨)
-원리 : SDS는 음전하를 갖는 강한 계면활성제로서 단백질의 소수성 부분에 달라붙는다.
2개의 아미노산 당 하나의 SDS분자가 비특이적으로 결합해 아미노산 R기들의 전하를 모두 상쇄시키고 균일하게 음전하로 코팅시킨다.
또한 단백질의 다양한 결합(수소결합, 소수성결합. .etc)들을 파괴해 3차원적 단백질 구조를 선형의 1차구조로 변성시킬 수 있다.

{2} Gel에 들어가는 시료의 역할
-Acrylamide-Bisphosphate: Acrylamide와 Bisacrylamide가 crosslink결합으로 그물구조를 형성해 단백들이 크기(분자량)별로 움직일 수 있게 됨.
-Tris-Hcl : 완충제(buffer)역할, Ph를 맞춰줌,
-SDS : 만약 sample buffer와 running buffer 속 SDS에 의해서도 변성되지 않은 단백질이 있다면 이를 변성시키기 위함. 또한 running buffer와 sample buffer와의 환경을 비슷하게 만들어주기 위함.

참고 자료

이화여대 2021-1학기 생명과학실험1 ppt
위키백과 ’ coomassie blue’
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%BF%A0%EB%A7%88%EC%8B%9C_%EB%B8%8C%EB%A6%B4%EB%A6%AC%EC%96%B8%ED%8A%B8_%EB%B8%94%EB%A3%A8
박선우 『 BIOLOGY 이론편 』, 좋은친구들(2020)