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[화학] SDS-PAGE

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최초 등록일
2005.07.12
최종 저작일
2005.04
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목차

1. Introduction
(1) SDS-PAGE
(2) sample buffer의 조성 및 역할
(3) running gel과 stacking gel의 조성 및 차이점(4) gel 굳히는 과정
(5) stain solution
2 Materials
3. Procedure
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Introduction
(1) SDS-PAGE
단백질의 분자량을 알아볼 때 쓰는 전기영동방법으로 Acrylamide와Methylenebisacrylamide가 중합반응을 일으켜 형성된 격자모양의 그물구조로 이루어진 gel 속을 SDS에 의하여 높은 charge를 갖은 단백질분자가 지나면서 크기에 의해 분류되는 방법이다.
(2) sample buffer의 조성 및 역할
․Tris - 전류가 흐를 수 있도록 전도체 역할을 해준다
․Glycerol - 침강제로 쓰인다.
․SDS(Sodium dodecyl sulfate, NaSO₃) :음전하의 계면활성제로 3차구조를 1차구조로 변 경하여 아미노산 한분자당 한분자의 SDS가 결합하게 된다. SDS는 SO₃ ̄ 때문에 -전하 를 띤다.

3. Procedure
① standard로 쓸 단백질과 미지시료를 4Xsample buffer와 섞었다.
② 위에서 섞은 화합물을 boat에 띄워 100°C의 물에서 5분간 heating하였다.
③ 가열한 화합물을 원심분리기를 이용하여 12000rpm으로 10초간 원심분리시켰다.
④ 원심분리한 standard로 쓸 단백질과 미지시료들을 mini gel에 차례로 loading하였다.
각 조마다 standard와 미지시료 두 개씩 loading하고 마지막 10번째에는 주변의 시료가 옆으로 새어들어오는 것을 막기위하여 1Xsample buffer를 loading하였다.

참고 자료

․http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110205&docid=182899&ts=10546 13503
․http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110202&docid=110827&ts=10494 35919
․http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?d1id=11&dir_id=110205&docid=1059559&ts=1097 229641
․생화학 실습 메뉴얼
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