Real-time PCR의 개념

소개글

- PCR의 과정

Step1. : primer, dNTP, 내열성 DNA polymerase를 함유하는 반응액 중에, 목적으로 하는 두 가닥 DNA단편을 열변성 한다. denaturation단계로 적절한 energy에 의해서 double strand가 손상 없이 각각의single strand로 풀어지게 된다.

목차

1. PCR의 개요
2. Real-Time PCR의 개념
3. Real-Time PCR에 의한 정량분석의 원리
4. 검출방법
5. Primer 설계
6. PCR 기술의 전망

본문내용

- PCR의 과정

Step1. : primer, dNTP, 내열성 DNA polymerase를 함유하는 반응액 중에, 목적으로 하는 두 가닥 DNA단편을 열변성 한다. denaturation단계로 적절한 energy에 의해서 double strand가 손상 없이 각각의single strand로 풀어지게 된다.




Step2. : annealing 단계로 각각 풀어진 single strand에 primer가 상보적인 sequense를 찾아서 결합하게 된다.



Step3. : extension로 Taq polymerase가 primer의 3’말단의 free OH기를 시작점으로 해서 단일가닥 template의 상보적인 dNTP를 가져와서 붙여 나가며 사슬 신장을 하게 된다.


Step4. : 증폭 산물로써의 두 가닥 DNA를 재 열변성 하여 한 가닥 DNA를 형성한다.
(Step 1으로 돌아가 반족 수행 하게됨).

이러한 과정을 통해 진행되는 PCR 위에서 언급 하였던 것과 마찬가지로 단계의 과정들을 한 개의 cycle로 하여 여러 cycles을 반복하게 된다.

참고 자료

미래를 향한 인간 도전 - 바이오테크놀러지. Borem 외. 김희봉 옮김. 2003.
알기 쉬운 바이오산업. 신흥종합연구소. 2000.
포스트게놈시대의 생명과학을 위한 신 분자유전학. 정해영. 도서출판 신일상사. 2001.
필수 유전학(제3판). Daniel L. Hartl & Elizabeth W. Jones. 양재섭 외 16명 옮김. 월드 사이언스. 2004.
현대의 생물공학과 생물산업. 전문진 외 3명. 아카데미 서적. 2003.
www.ambion.com
www.appliedbiosystems.com
www.pathmicro.med.sc.edu